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    89Zr标记干细胞及SD大鼠PET/CT显像
    发表时间:2018-04-20
    目的:89Zr标记干细胞及小动物PET/CT扫描研究89Zr-干细胞在正常SD大鼠体内分布特征,为干细胞活体分布研究提供依据。
     
    实验方法: 
    89Zr标记干细胞和质量控制
    干细胞的89Zr标记:干细胞通过去铁胺DFO与89Zr连接,从而实现干细胞的标记。通过缓冲液多次离心洗涤89Zr标记细胞,去除游离89Zr,获得89Zr-干细胞。
    质量控制:离心收集89Zr-干细胞沉淀和上清液,使用γ计数的方法分别检测89Zr-干细胞沉淀和上清液中的放射性剂量,以89Zr-干细胞沉淀所占总放射性百分比作为89Zr-干细胞的放射性化学纯度。
     
    小动物PET/CT扫描
    4只正常SD大鼠尾静脉单次注射89Zr-干细胞15.29±0.65 μCi,随后在不同时间点(1 h至504 h)分别进行小动物PET/CT扫描(扫描时间:10-30 min)。扫描采集结束后,对PET图像进行分析,勾画心、肝、肺、肾、骨关节、肌肉和脑为感兴趣区域(Region of Interest,ROI),计算%ID/g值,进而分析89Zr-干细胞在正常SD大鼠体内主要脏器的分布情况。
     
    实验结果:
    标记和质控
    检测结果显示89Zr-干细胞的化学纯度为84.4%。使用台盼蓝染色法检测89Zr-干细胞的细胞活率为68.75%。
    体外增殖实验:使用CCK-8试剂盒对干细胞和89Zr-干细胞的增殖能力进行评价,89Zr-干细胞在体外具有增殖能力,但增殖速度低于干细胞,结果见图1。
    图1: 89Zr-干细胞增殖实验结果
     
     
    小动物PET/CT扫描结果
    图2:正常SD大鼠静脉给予89Zr-干细胞后不同时间点的小动物PET/CT扫描MIP图
     
    正常SD大鼠注射89Zr-干细胞后,主要分布于肺、肝和心等脏器。在肺部的摄取值最高(1 h时肺部%ID/g值最高,为12.06±1.73),并随时间的延长逐渐降低。在1 h至24 h内,部分肠有高摄取,摄取值在1 h时最高,%ID/g值为4.50±2.75;72 h时,肠摄取值快速下降后趋于稳定。在1 h至504 h内,肝脏的摄取值呈现先升高后下降的趋势,摄取值最高时间点为24 h,%ID/g值1.89±0.62。心脏的摄取值变化趋势与肺部一致,随时间的延长而逐渐降低,最高摄取时间点为1 h,摄取值%ID/g为0.59±0.24。
     
    结论
    建立89Zr标记干细胞的有效方法,并对标记后干细胞的活率和增殖能力进行检测。通过小动物PET/CT显像观察89Zr-干细胞在正常SD大鼠体内的分布发现,干细胞经尾静脉注射后主要分布于肺、肝和心等脏器。该方法可为研究干细胞在体内分布提供依据。

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